Rezumatul propunerii pentru Proiectul de cercetare ANTIOX:

O directie de mare actualitate in cercetarea biomedicala moderna are in vedere utilizarea potentialului terapeutic al unor compusi prezenti in plante ca alternativa la medicamentele de sinteza care, de multe ori, pe langa costurile ridicate, implica o serie de riscuri si/sau efecte adverse. in proiectul de fata ne propunem o abordare complexa a efectelor a doua bioflavonoide (quercetina si epigalocatechina galata), atat la nivel subcelular (bistrat lipidic, transportori membranari – inclusiv modelare) cat si la cel celular. Obiectivele principale sunt:

• Studiul efectului flavonoidelor la nivelul membranelor artificiale (tehnica BLM) si naturale (anizotropie de fluorescenta) in conditii normale si de stress: prezenta unor metale grele, celule sanguine provenite de la diabetici etc.

• Investigarea efectelor flavonoidelor asupra mecanismelor de transport membranar, proteinele implicate fiind receptorul nicotinic de acetilcolina, ce va fi studiat prin metoda electrofiziologica patch-clamp, si canalul epitelial de sodiu sensibil la amilorida, pentru care se vor utiliza tehnicile de scurt circuit si analiza de zgomot; se include un model teoretic al mecanismului de actiune a quercetinei asupra canalelor de calciu din ER.

• Investigarea efectelor celor doua bioflavonoide asupra unor celule tratate cu antimitoticul nocodazol utilizand tehnica luminescentei intarziate.

• Studiul efectelor flavonoidelor asupra viabilitatii si proliferarii celulare si asupra unor mecanisme particulare implicate in semnalizarea intracelulara ce determina supravietuirea/proliferarea sau apoptoza/necroza celulara (schimbari in fluiditate, permeabilitate si potential membranar, nivel si semnalizare prin calciu, nivel de fosforilare a unor proteine cheie implicate in semnalizare prin MAPK, distributie, masa si morfologie mitocondriala, stare redox si nivel de specii active de oxigen) vor fi urmarite prin microscopie (conventionala, contrast de faza, de fluorescenta si confocala), fluorimetrie stationara, citometrie in flux, spectrofotometrie, electroforeza (SDS-PAGE)- electroblotare Western – chemiluminescenta amplificata (CLA) si analiza de imagine in studii pe suspensii celulare sau/si pe populatii de celule individuale in conditii normale si de stress.

• Se va urmari gasirea dozelor de flavonoide pentru care efectele pot fi benefice sau, dimpotriva, toxice.

Tematica proiectului se inscrie in domeniul Sanatate si in platforma tehnologica europeana Plante pentru viitor.